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垂直轉(zhuǎn)印電泳槽分析報(bào)告

更新時(shí)間:2016-12-07      點(diǎn)擊次數(shù):2335
   垂直轉(zhuǎn)印電泳槽是凝膠電泳系統(tǒng)的核心部分,其系統(tǒng)的迅猛發(fā)展主要也是體現(xiàn)在電泳槽上。根據(jù)電泳的原理,凝膠都是放在兩個(gè)緩沖腔之間,電場通過凝膠連接兩個(gè)緩沖腔。緩沖液和凝膠之問的接觸可以是直接的液體接觸,也可以間接通過凝膠條或?yàn)V紙條。管狀凝膠電泳和垂直板狀電泳大多采取直接液體接觸方式。這種方式可以有效地使用電場,但在裝置設(shè)計(jì)上有一些困難,如液體泄漏,電安全和操作麻煩等問題。垂直轉(zhuǎn)印電泳槽大多通過間接方式,用濾紙橋搭接。以及zui近使用緩沖液制作的凝膠條和濾紙條搭接,即半干技術(shù),后種方式使裝置簡化,操作也大大方便。
  電源提供直流電,在垂直轉(zhuǎn)印電泳槽中產(chǎn)生電場,驅(qū)動(dòng)帶電分子的遷移。電泳槽是電泳系統(tǒng)的核心部分,根據(jù)電泳的原理,電泳支持物都是放在兩個(gè)緩沖液之間,電場通過電泳支持物連接兩個(gè)緩沖液,不同電泳采用不同的電泳槽.常用的電泳槽有:
  1、垂直板式電泳:制膠和電泳不在電泳管中,而是在塊垂直放置的平行玻璃板中間,常用于聚丙烯酰胺凝膠電泳中蛋白質(zhì)的分離和對少量核酸及蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行垂直電泳。垂直轉(zhuǎn)印電泳槽中間是夾在一起的兩塊玻璃板,玻璃板兩邊由塑料條隔開,在玻璃平板中間制備電泳凝膠,凝膠的大小通常是12cm~14cm,厚度為1mm~2mm,制膠時(shí)在凝膠溶液中放一個(gè)塑料梳子,在膠聚合后移去,形成上樣品的凹槽。垂直垂直轉(zhuǎn)印電泳槽也有不同型號,一般分為小型,中型和大型,差別是凝膠板規(guī)格大小和試樣格齒數(shù)及厚度。
  2、水平式電泳:凝膠鋪在水平的玻璃或塑料板上,用一薄層濕濾紙連接凝膠和電泳緩沖液,或?qū)⒛z直接浸入緩沖液中。由于pH值的改變會引起帶電分子電荷的改變,進(jìn)而影響其電泳遷移的速度,所以電泳過程應(yīng)在適當(dāng)?shù)木彌_液中進(jìn)行的,緩沖液可以保持待分離物的帶電性質(zhì)的穩(wěn)定。水平式電泳用于對少量或大批量核酸進(jìn)行瓊脂糖電泳。水平垂直轉(zhuǎn)印電泳槽有不同型號,一般分為迷你型,小號,中號和大號,主要差別同樣是凝膠板規(guī)格大小和試樣格齒數(shù)及厚度。迷你型的試樣格齒數(shù)一般有十齒左右,小號通常6~15齒不等,中號大多三十幾齒,大號可達(dá)48齒。
  3、等電聚焦多用途電泳槽:適合于分離分子量相近而等電點(diǎn)不同的蛋白質(zhì)組分
  4、轉(zhuǎn)移垂直轉(zhuǎn)印電泳槽:用來對少量核酸及蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行轉(zhuǎn)移電泳的裝置。分為槽式轉(zhuǎn)印,半干轉(zhuǎn)印,微量過濾和篩選,真空轉(zhuǎn)印。槽式轉(zhuǎn)印系統(tǒng)可理想地用于多數(shù)常規(guī)蛋白研究,可靈活選擇電壓設(shè)置,轉(zhuǎn)印時(shí)間和冷卻方法。半干轉(zhuǎn)印槽無需緩沖液槽或轉(zhuǎn)印夾就能實(shí)現(xiàn)快速,有效,經(jīng)濟(jì)的轉(zhuǎn)印,zui適于中等分子量大小的蛋白,也能從瓊脂糖凝膠上轉(zhuǎn)印DNA和RNA。微量過濾用于新印跡分析中確定工作條件,或其他不要求凝膠電泳分辨率的應(yīng)用。適于蛋白和核酸的雜交。真空轉(zhuǎn)印能快速而有效的把DNA或RNA從瓊脂糖凝膠轉(zhuǎn)到尼龍膜??傊梢越Y(jié)合自身需求選擇合適的垂直轉(zhuǎn)印電泳槽儀器。
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