溫度控制是決定PCR反應(yīng)能否成功的關(guān)鍵,主要包括溫度的準(zhǔn)確性、均一性以及升降溫速度。對(duì)梯度基因擴(kuò)增儀來(lái)說(shuō),還必須考慮
JS-G基因擴(kuò)增儀在梯度模式和標(biāo)準(zhǔn)模式下是否具有同樣的溫度特性。實(shí)時(shí)熒光定量JS-G基因擴(kuò)增儀均有熒光檢測(cè)系統(tǒng),主要包括激發(fā)光源和檢測(cè)器。簡(jiǎn)便的人性化設(shè)計(jì)zui能滿足其需求。多樣化樣品基座設(shè)計(jì)、熱蓋等都使基因擴(kuò)增儀越來(lái)越人性化。
JS-G基因擴(kuò)增儀廠家為您分析不同的類型的儀器各有什么不同的特點(diǎn):
1、金屬板式實(shí)時(shí)定量基因擴(kuò)增儀,還可作為普通PCR儀使用,有的甚至帶梯度功能,可容納的樣本量大,無(wú)需特殊耗材,但溫度均一性欠佳,有邊緣效應(yīng),標(biāo)準(zhǔn)曲線的反應(yīng)條件難以做到與樣品*一致。
2、離心式實(shí)時(shí)定量基因擴(kuò)增儀的PCR擴(kuò)增樣品槽被設(shè)計(jì)為離心轉(zhuǎn)子,溫度均一性好,但可容納樣品量少,有的需用特殊毛細(xì)管作樣品管,增加了使用成本,也不帶梯度功能。
3、各孔獨(dú)立控溫的定量基因擴(kuò)增儀的不同樣品槽分別擁有獨(dú)立的智能升降溫模塊,各孔獨(dú)立控溫,適合多指標(biāo)快速檢測(cè),可實(shí)現(xiàn)任意梯度反應(yīng),但上樣不如傳統(tǒng)方法方便,而且需要*的扁平反應(yīng)管,使用成本較高。
根據(jù)DNA擴(kuò)增的目的和檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn),JS-G基因擴(kuò)增儀廠家將儀器分為普通基因擴(kuò)增儀,梯度基因擴(kuò)增儀,原位基因擴(kuò)增儀,實(shí)時(shí)熒光定量基因擴(kuò)增儀四類,下面我們就來(lái)看下他們具體的特色:
1、普通的基因擴(kuò)增儀:把一次PCR擴(kuò)增只能運(yùn)行一個(gè)特定退火溫度的PCR儀,叫傳統(tǒng)的PCR儀,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運(yùn)行。主要是做簡(jiǎn)單的,對(duì)目的基因退火溫度的擴(kuò)增。該儀器主要應(yīng)用于科研研究,教學(xué),醫(yī)學(xué)臨床,檢驗(yàn)檢疫等機(jī)構(gòu)。
2、梯度JS-G基因擴(kuò)增儀:把一次性pcr擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度),通常12種溫度梯度,這樣的儀器就叫梯度PCR儀。因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同DNA片段,其zui適退火溫度不同,通過(guò)設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增,從而一次性PCR擴(kuò)增,就可以篩選出表達(dá)量高的zui適退火溫度,進(jìn)行有效的擴(kuò)增。
3、原位基因擴(kuò)增儀:用于從細(xì)胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細(xì)胞內(nèi)基因擴(kuò)增儀,如病源基因在細(xì)胞的位置或目的基因在細(xì)胞內(nèi)的作用位置等。是保持細(xì)胞或組織的完整性,使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細(xì)胞中,在細(xì)胞的靶DNA所在的位置上進(jìn)行基因擴(kuò)增,不但可以檢測(cè)到靶DNA,又能標(biāo)出靶序列在細(xì)胞內(nèi)的位置,于分子和細(xì)胞水平上研究疾病的發(fā)病機(jī)理和臨床過(guò)程及病理的轉(zhuǎn)變有重大的實(shí)用價(jià)值。
4、實(shí)時(shí)熒光定量基因擴(kuò)增儀:在普通JS-G基因擴(kuò)增儀的基礎(chǔ)上增加一個(gè)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng),就成了熒光定量PCR儀。其PCR擴(kuò)增原理和普通PCR儀擴(kuò)增原理相同,只是PCR擴(kuò)增時(shí)加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記,使用引物和熒光探針同時(shí)與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。擴(kuò)增的結(jié)果通過(guò)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)實(shí)時(shí)采集信號(hào)連接輸送到計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)得出量化的實(shí)時(shí)結(jié)果輸出。把這JS-G基因擴(kuò)增儀叫做實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。